SI se puede!
por ejemplo, si quieres validar la columna A:
entonces :
1-selecciona toda la columna
2-ve a Datos|validacion...
3-en configuracion elijes:
criterio de validacion->perzonalizada
y en formula->=CONTAR.SI($A:$A,A1)=1
y ya esta esto te desplegara un mensaje que tambien puedes perzonalidzr